細(xì)胞光毒性實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選用哪種紫外輻照儀?
為什么要進(jìn)行光毒性實(shí)驗(yàn)?
皮膚接觸受試物并經(jīng)過(guò)紫外線照射,通過(guò)作用于機(jī)體免疫系統(tǒng),誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生光致敏狀態(tài),經(jīng)過(guò)一定間歇期后,皮膚再次接觸同一受試物并在紫外線照射下,引起特定的皮膚反應(yīng),其反應(yīng)形式包括:紅斑,水腫等。
廣義的光敏性(Photosensitivity)包括光毒性(Phototoxicity,又稱為光刺激性,photoirritation)與光變態(tài)(Photoallergy)。
皮膚光變態(tài)反應(yīng)是一種細(xì)胞介導(dǎo)的由光激活的皮膚免疫性反應(yīng),是IV型過(guò)敏反應(yīng)的特殊類型,系光感物質(zhì)經(jīng)皮吸收或通過(guò)循環(huán)到達(dá)皮膚后與吸收的光線在皮膚細(xì)胞層發(fā)生的不良反應(yīng)。目前較為公認(rèn)的原理為:光感物質(zhì)吸收光能后成激活狀態(tài),并以半抗原形式與皮膚中的蛋白結(jié)合成蛋白結(jié)合物,經(jīng)表皮的郎罕氏細(xì)胞傳遞給免疫活性細(xì)胞,引起淋巴細(xì)胞致敏等免疫反應(yīng)。致敏的淋巴細(xì)胞再次接觸同一抗原時(shí)釋放出淋巴因子,導(dǎo)致一系列有害反應(yīng)。
除育發(fā)類、防曬類和祛斑類產(chǎn)品外,防曬劑(二氧化鈦和氧化鋅除外)含量≥0.5%(w/w)的產(chǎn)品也應(yīng)進(jìn)行皮膚光毒性試驗(yàn)。
光毒性實(shí)驗(yàn)規(guī)范:
食品藥品監(jiān)督管理總局的《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》第18項(xiàng)毒理學(xué)試驗(yàn)方法規(guī)定:
選擇合適的光源必須符合的標(biāo)準(zhǔn)包括:光源發(fā)射的光波長(zhǎng)能被受試物吸收(吸收光譜),光的劑量(在一個(gè)合理的暴露時(shí)間內(nèi)能達(dá)到的劑量)能滿足已知光毒性化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)。此外的波長(zhǎng)和劑量不能有損于試驗(yàn)系統(tǒng),如(紅外區(qū)域)熱量散發(fā)或類似UVB波長(zhǎng)的高細(xì)胞毒性的干擾,因此光源要求能夠穩(wěn)定地釋放UVA和可見(jiàn)光波長(zhǎng)。由于的太陽(yáng)光模擬器都發(fā)射出相當(dāng)數(shù)量的UVB,應(yīng)經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)倪^(guò)濾使UVB<0.1J/cm2。透過(guò)96孔組織培養(yǎng)板蓋的光強(qiáng)度建議為1.7mW/cm2光強(qiáng)度(即5J/cm2)劑量。
LUYOR-3450紫外輻照儀內(nèi)置了高精度紫外線傳感器,能夠準(zhǔn)確計(jì)量紫外輻照能量,自動(dòng)運(yùn)算紫外輻照時(shí)間,能量輻照完自動(dòng)停止運(yùn)行,內(nèi)置了UVA紫外線燈管,透過(guò)96孔組織培養(yǎng)板蓋的光強(qiáng)度為1.7-1.9mW/cm2,UVB能量接近為零。內(nèi)置了雙風(fēng)扇抽風(fēng),保證了輻照腔內(nèi)溫度保持為室溫。LUYOR-3450紫外輻照儀是完全符合《化妝品用化學(xué)原料體外3T3中性紅攝取光毒性試驗(yàn)方法》的實(shí)驗(yàn)規(guī)范。
有些企業(yè)使用太陽(yáng)光模擬器進(jìn)行細(xì)胞光毒性實(shí)驗(yàn),因?yàn)樘?yáng)光模擬器都是數(shù)千瓦的大功率光源,雖然這種氙燈能夠模擬太陽(yáng)光的光譜,但卻能夠產(chǎn)生大量熱能和有害的短波紫外線和中波紫外線,盡管有些設(shè)備安裝了紫外濾光片和紅外濾光片,但并沒(méi)有完全阻隔掉,這幾種因素都會(huì)對(duì)細(xì)胞造成了很大的傷亡,造成細(xì)胞壞死,嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果誤判。
LUYOR-3450和傳統(tǒng)的太陽(yáng)光模擬器對(duì)比性能優(yōu)勢(shì):
1.低功率運(yùn)行,不會(huì)產(chǎn)生大量熱量,LUYOR-3450滿功率只有60w,太陽(yáng)光模擬器大多數(shù)為500w.
2.UVA燈管,沒(méi)有UVB傷害,太陽(yáng)光模擬器會(huì)發(fā)射一定能量的UVB.
3.內(nèi)置高精度紫外線傳感器,無(wú)需額外購(gòu)買紫外福照度計(jì)。
4.設(shè)定好能量值,自動(dòng)運(yùn)行,輻照結(jié)束,自動(dòng)停止。無(wú)需人工看護(hù)。
5.出廠設(shè)定光強(qiáng)度為為1.7-1.9mW/cm2,無(wú)需繁瑣的燈具調(diào)整。
6.安全結(jié)構(gòu)門鎖,開(kāi)門自動(dòng)關(guān)閉紫外光源,對(duì)操作者和周圍人員無(wú)紫外輻射。
7.光源壽命大約5000-8000小時(shí),是傳統(tǒng)太陽(yáng)光模擬器的光源5-10倍。
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