很多同學(xué)覺(jué)得GFP和EGFP、avGFP都是綠色熒光蛋白,激發(fā)波長(zhǎng)應(yīng)該都一樣,用便攜式熒光蛋白激發(fā)光源的450nm波段去觀察GFP的表達(dá),但有時(shí)候無(wú)法看到gfp的熒光表達(dá),不知道是設(shè)備原因還是沒(méi)有表達(dá)成功。
大家在觀察熒光蛋白表達(dá)之前,一定要看自己質(zhì)粒圖譜用的到底是哪種GFP,如果是GFP、wtGFP、avGFP必須用紫外光源去激發(fā)(365nm波段,LUYOR-3280UV),如果的eGFP、mEGFP那要藍(lán)光波段(450nm LUYOR-3280RB)去激發(fā)。
下面是幾種綠色熒光蛋白的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)圖譜:
GFP又名 wtGFP, avGFP, gfp10, 綠色熒光蛋白
GFP綠色熒光蛋白是一種基本的(構(gòu)成熒光的)長(zhǎng)斯托克斯位移熒光蛋白,發(fā)表于1992年,來(lái)源于Aequorea victoria。它對(duì)酸的敏感性低。GFP激發(fā)光的波長(zhǎng)是395nm,mEGFP發(fā)射光的波長(zhǎng)是509nm。
圖一:wtGFP, avGFP熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光
EGFP又名增強(qiáng)型GFP,GFPmut1
EGFP綠色熒光蛋白是1996年發(fā)表的一種堿性(構(gòu)成性熒光)綠色熒光蛋白,來(lái)源于Aequorea victoria。據(jù)報(bào)道,它是一種快速成熟的弱二聚體,具有中等酸敏感性。mEGFP激發(fā)光的波長(zhǎng)是488nm,mEGFP發(fā)射光的波長(zhǎng)是507nm
圖二:eGFP熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光
mEGFP綠色熒光蛋白
mEGFP綠色熒光蛋白是2002年發(fā)表的一種堿性(構(gòu)成性熒光)綠色熒光蛋白,來(lái)源于Aequorea victoria。它具有中等酸敏感性。mEGFP激發(fā)光的波長(zhǎng)是488nm,mEGFP發(fā)射光的波長(zhǎng)是507nm。
圖三:mEGFP熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光
如果您想觀察熒光蛋白在動(dòng)植物上的表達(dá),建議使用便攜式激發(fā)光源,上海峰志儀器有限公司銷(xiāo)售便攜式雙波長(zhǎng)熒光蛋白激發(fā)光源,具體詳細(xì)介紹請(qǐng)瀏覽《便攜式熒光蛋白激發(fā)光源LUYOR-3415RG》。推薦使用LUYOR-3415便攜式雙波長(zhǎng)激發(fā)光源或《LUYOR-3280熒光手電筒》,這樣您就可以用便攜式熒光蛋白激發(fā)光源直接觀察熒光蛋白在植物的種子、愈傷、根系和葉片上的表達(dá)。上海峰志儀器有限公司免費(fèi)提供便攜式熒光蛋白激發(fā)光源樣機(jī)試用,滿意付款,具體請(qǐng)按照網(wǎng)頁(yè)底部聯(lián)系信息電話或.聯(lián)系。
公司在北京、武漢、鄭州、??凇⒐枮I有代理商,激發(fā)光源產(chǎn)品可以免費(fèi)試用。
圖五:GFP在水稻種子上的表達(dá)
綠色熒光蛋白的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)
熒光蛋白 | 激發(fā)光EX(nm) | 發(fā)射光EM(nm) |
TagGFP | 482nm | 505nm |
cgigGFP | 399 | 496 |
fabdGFP | 508 | 520 |
EGFP | 488 | 507 |
CGFP | 463 | 506 |
mmGFP | 398 | 505 |
muGFP | 490 | 508 |
oxGFP | 486 | 510 |
usGFP | 490 | 508 |
mEGFP | 488 | 507 |
eYGFP | 507 | 516 |
avGFP | 395 | 509 |
cEGFP | 489 | 507 |
EaGFP | 506 | 514 |
dfGFP | 505 | 524 |
ECGFP | 463 | 506 |
laGFP | 502 | 511 |
hmGFP | 490 | 510 |
推薦瀏覽更多熒光蛋白表達(dá)的效果圖:(熒光蛋白表達(dá)的案例展示)
本文圖片轉(zhuǎn)自http://www.luyor.cn 圖片版權(quán)歸屬于上海路陽(yáng)儀器有限公司。