UCL-3500紫外交聯(lián)儀用于CLIP-seq實(shí)驗(yàn)
UCL-3500紫外交聯(lián)儀為一款254nm短波紫外交聯(lián)儀,內(nèi)部安裝了6根15w 254nm紫外線(xiàn)燈管,采用了鋁合金輻照腔,輻照腔面積大,紫外線(xiàn)輻照均勻,滿(mǎn)足各種紫外線(xiàn)輻照實(shí)驗(yàn),是Northern, Southern,Slot或Dot印跡固膜、CLIP-seq實(shí)驗(yàn)的工具。
CLIP-seq,又稱(chēng)為HITS-CLIP,即紫外交聯(lián)免疫沉淀結(jié)合高通量測(cè)序(crosslinking-immunoprecipitation and high-throughput sequencing), 是一項(xiàng)在全基因組水平揭示RNA分子與RNA結(jié)合蛋白相互作用的革命性技術(shù)。
CLIP-seq主要原理是基于RNA分子與RNA結(jié)合蛋白在254nm紫外照射下發(fā)生耦聯(lián),以RNA結(jié)合蛋白的特異性抗體將RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體沉淀之后,回收其中的RNA片段,經(jīng)添加接頭、RT-PCR等步驟,對(duì)這些分子進(jìn)行高通量測(cè)序,再經(jīng)生物信息學(xué)的分析和處理、總結(jié),挖掘出其特定規(guī)律,從而深入揭示RNA結(jié)合蛋白與RNA分子的調(diào)控作用及其對(duì)生命的意義。
CLIP-seq 紫外輻照能量設(shè)置為:
打開(kāi)UCL-3500紫外交聯(lián)儀電源。
將要輻照的細(xì)胞放進(jìn)紫外交聯(lián)儀的輻照腔內(nèi)。
按壓程序按鍵(program)選擇能量模式(energy),能量模式綠色指示燈點(diǎn)亮。
通過(guò)數(shù)字按鍵按壓0.4,再按enter按鍵,0.4J/cm2能量設(shè)置完成。
按start按鍵,輻照開(kāi)始,顯示屏顯示剩余能量,輻照完成后,交聯(lián)儀自動(dòng)停止輻照。
取出輻照的細(xì)胞,關(guān)閉交聯(lián)儀電源。