UCL-3200紫外交聯(lián)儀
美國路陽公司(LUYOR)的UCL-3200/3500紫外交聯(lián)儀是安裝6根短波254nm紫外線燈管的短波紫外交聯(lián)儀,設計實用,用途廣泛。采用智能微處理控制系統(tǒng)和實時紫外監(jiān)測系統(tǒng)。可以更快、更的安全地得到可靠無誤的結(jié)果,減少無須的調(diào)整時間,不必要的重復過程和不期望的樣品污染。美國路陽公司(LUYOR)的UCL-3500紫外交聯(lián)儀是使這些創(chuàng)新性儀器成為客戶需要的設備。
UCL-3200紫外交聯(lián)儀的原理,在254nm波長的紫外線照射下核酸與蛋白質(zhì)產(chǎn)生共價鍵,核酸能鉚釘在硝酸纖維素膜上,因此使用254nm的紫外交聯(lián)儀,可以確保核酸交聯(lián)到尼龍膜上。
由于UCL-3200紫外交聯(lián)儀配置了一種紫外能量程序控制系統(tǒng)(Joules/cm2),即其中的時間積分儀連續(xù)檢測紫外光的照射。當能量吸收值達到設定值時,照射將自動停止。所以不管紫外光源強弱與否、時間差異與否,照射循環(huán)均有很好的重復性。
UCL-3200紫外交聯(lián)儀是一種多用途的短波254mm紫外輻射系統(tǒng)主要用于將核酸交聯(lián)于膜上。還可用于瓊脂糖凝膠中DNA的切割、RecA突變篩選、嘧啶二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化、UV滅菌消除PCR污染等。在紫外滅菌、聚合物紫外處理等方面也有應用價值。
UCL-3200/3500為254nm的短波紫外交聯(lián)儀
UCL-3200M/3500M為302nm的中波紫外交聯(lián)儀
UCL-3200L/3500L為365nm的長波紫外交聯(lián)儀
產(chǎn)品應用
紫外線誘發(fā)的突變
膜交聯(lián)
生物分子交聯(lián)
紫外線劑量已校準
下面表格為紫外交聯(lián)儀能量換算方法:
紫外交聯(lián)儀的UV能量單位換算公式如下:
能量單位: 焦耳(J)
光強的能量單位:J/m2 , mJ/ cm2,即單位面積上的光能量
1焦耳(J) = 1牛頓/米=1瓦特(W)/秒(S)
1J/cm2 = 1000mJ/ cm2 = 1000000uJ/ cm2
1J/m2 = 1000mJ/ m2 = 1000000uJ/m2
1J/m2 = 0.1mJ/ cm2
紫外線強度單位:mw/cm2和w/m2如何換算?
1W/m2=103 mW/m2 =106uW/m2
1W/m2 =1000mW/ 10000cm2 =0.1mW/cm2=100 uW/cm2
1 W/m2 = 0.1 mW/cm2
1 mW/cm2 =1000 uW/cm2 =10 W/m2
美國路陽UCL-3200紫外交聯(lián)儀產(chǎn)品特點
內(nèi)置紫外輻射計可實現(xiàn)自動測量
安全聯(lián)鎖裝置,防止用戶意外暴露在紫外線下
能夠提供10 J / cm 2 的UVA,UVB或UVC
高度均勻的表面照明
尺寸緊湊,可容納有限的實驗室空間
做紫外線輻照箱使用
UCL-3200提供接近均勻的UVC光,其均勻度誤差小于10% ,UCL-3200具有UVC劑量的實時監(jiān)控功能,以確??芍貜褪褂玫膭┝?,而不受空間和時間的影響。
固定核酸到膜上
UCL-3200是一個微處理器控制的UV照射系統(tǒng),專用于核酸與膜的連接,適用于Southern,Northern,Dot和Slot Blot應用。它也可以用于紫外線和消除PCR污染。
微處理器控制的再現(xiàn)性
可編程微處理器一直監(jiān)控紫外線的發(fā)射。當達到設定的能量時,輻照將立即停止。因此,可以補償由于紫外線燈管老化而導致的UV強度降低的影響。
耐用性
不銹鋼輻射室和鏡面花紋鋁制紫外線反射板,確保紫外線的均勻性,腔體頂部的紫外線傳感器不易被污染。
易于使用
大型顯示器提供了一系列預定義的方法,使UCL-3200成為易于使用切功能強大的儀器,用于將核酸固定在膜上。編程的數(shù)據(jù)顯示在LED顯示屏上。
美國路陽UCL-3200紫外交聯(lián)儀技術數(shù)據(jù)
技術指標 | UCL-3200 | UCL-3200M | UCL-3200L | |
波長范圍 | 254nm | 302/312nm | 365nm | |
紫外線燈管 | 6 x 8瓦 | |||
編程 | 9組預設輻射能量值 | |||
能量 | 0.000 至 9.999 焦耳或 0.00 至 99.99 焦耳 | |||
時間 | 00.00 至 99.59 分鐘或 000.0 至 599.5 分鐘 | |||
溫度 | 15?C-35?C | |||
濕度 | 70%無凝結(jié) | |||
外殼表面溫度 | ≤30?攝氏度 | |||
啟動時間 | <1秒 | |||
外部尺寸(長x寬x高) | 40厘米x 34厘米x 30厘米 | |||
內(nèi)部尺寸(長x寬x高) | 32厘米x 30厘米x 16厘米 | |||
重量 | 9公斤 | |||
功率 | 60w | |||
資質(zhì)認證 | CE |
UCL-3200/3500快速操作指南
按照能量輻照:
按壓Program按鍵,Energy led綠燈亮,通過數(shù)字鍵盤輸入能量值,按Enter確定,按Star開始。
按照時間輻照:
按壓Program按鍵,Time led紅燈亮,通過數(shù)字鍵盤輸入時間值,按Enter確定,按Star開始。例如:輻照55分鐘15秒,輸入:55.15即可。
9組預設方法:
能量預設置模式:
A: 按Program選擇能量模式,通過數(shù)字按鍵輸入能量值,單位是焦耳(例如10J),按Enter按鍵,
B:再按preset(藍燈亮),按Enter按鍵,顯示屏顯示P.在數(shù)字按鍵選擇預置通道3(1-9).
使用預設能量值照射步驟:
A:按Program選擇能量模式,按Preset(preset燈亮),再數(shù)字鍵盤上按存儲的通道數(shù)(3),顯示屏將顯示預設能量值(10J)
B:按start,開始照射。
時間預設值模式:
A:按Program]選擇時間模式,(time)紅色led燈亮。通過數(shù)字按鍵輸入需要設置的時間1.11(以分鐘和十分之一分鐘為單位),按Enter。
B:再按Preset按鍵(preset燈亮),按Enter按鍵,顯示屏顯示P.在數(shù)字按鍵選擇預置通道3(1-9).
使用預設時間值照射步驟:
A:按Program選擇time模式,按Preset(preset燈亮),再數(shù)字鍵盤上按存儲的通道數(shù)(3),顯示屏將顯示1.11
B:按Start,開始照射。
時間設置說明:
XXX.X時候,zui大輸入值為599.5分鐘,599為599分鐘,0.5代表為5x1/10, 0.1代表為6秒鐘,XX.XX時候,zui大輸入值為99.59分鐘。
如何設置小于60秒為單位的照射時間:
按Program選擇time模式,按小數(shù)點按鍵,再按要設置的秒數(shù),比如:要照射55秒,在鍵盤上輸入0.55即可。42秒,在鍵盤上輸入0.42即可。如果是1分30秒,要輸入1.30,如果是1分45秒,要輸入1.45.
注意:小數(shù)點后面大只能選擇1-5, 6-9是無法輸入的。
紫外交聯(lián)儀的紫外線強度和能量換算
紫外能量換算:
1 J/cm2= 1,000 mJ/cm2= 1,000,000 uJ/cm2 = 10,000 J/m2
紫外強度換算:
1 W/cm2=1,000 mW/cm2= 1,000,000μW/cm2 = 10,000 W/m2
能量(mJ/cm2)=強度(mW/cm2)x 時間(秒sec)
常用轉(zhuǎn)膜能量:120000uJ/cm2 =120 mJ/cm2 =0.12 J/cm2
紫外交聯(lián)儀用于Southern印跡雜交
Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補的原則特異性地雜交形成雙鏈。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上,經(jīng)干烤或者紫外交聯(lián)儀的紫外線照射固定,再與相對應結(jié)構的標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量 。
由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性,綜合凝膠電泳和核酸內(nèi)切限制酶分析的結(jié)果,便可繪制出DNA分子的限制圖譜。但為了進一步構建出DNA分子的遺傳圖,或進行目的基因序列的測定以滿足基因克隆的特殊要求,還必須掌握DNA分子中基因編碼區(qū)的大小和位置。有關這類數(shù)據(jù)資料可應用Southern印跡雜交技術獲得。
Southern印跡雜交技術包括兩個主要過程:一是將待測定核酸分子通過一定的方法轉(zhuǎn)移并結(jié)合到一定的固相支持物(硝酸纖維素膜或尼龍膜)上,即印跡(blotting);二是固定于膜上的核酸與同位素標記的探針在一定的溫度和離子強度下退火,即分子雜交過程。該技術是1975年英國愛丁堡大學的E.M.Southern首創(chuàng)的,Southern印跡雜交故因此而得名。早期的Southern印跡是將凝膠中的DNA變性后,經(jīng)毛細管的虹吸作用,轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上。印跡方法如電轉(zhuǎn)法、真空轉(zhuǎn)移法;濾膜發(fā)展了尼龍膜、化學活化膜(如APT、ABM纖維素膜)等。利用Southern印跡法可進行克隆基因的酶切、圖譜分析、基因組中某一基因的定性及定量分析、基因突變分析及限制性片斷長度多態(tài)性分析(RFLP)等。
紫外交聯(lián)儀為什么有人稱為DNA紫外交聯(lián)儀,核酸紫外交聯(lián)儀?
紫外交聯(lián)儀主要用于Northern和Southern印跡雜交實驗中將DNA或RNA從凝膠轉(zhuǎn)移到尼龍膜后固膜。
Northern印跡雜交(Northern blot)。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術由Southern于1975年創(chuàng)建,稱為Southern印跡技術,RNA印跡技術正好與DNA相對應,故被稱為Northern印跡雜交,與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術則被稱為Western blot。
Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上,經(jīng)干烤或者紫外線照射固定,再與相對應結(jié)構的標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。
DNA是核酸的一種,核酸包括DNA和RNA。核酸的功效與作用是合成蛋白、維持機體免疫反應和抗氧化,核酸是一種生物大分子,在蛋白質(zhì)的復制和合成中既儲存和傳遞遺傳信息的作用,能夠維持機體正常的免疫反應,具有一定抗氧化的作用,還能夠促進細胞的分化以及影響生物合成,又能夠促進身體營養(yǎng)的吸收和利用。
斑點雜交(dot blot)是指將待測的DNA變性后點加在硝酸纖維素膜(或尼龍膜、NC膜)上,用已標記的探針進行雜交,洗膜(除去未接合的探針),放射自顯影,判斷是否有雜交及其雜交強度,主要用于基因缺失或拷貝數(shù)改變的檢測。
狹縫斑點雜交(slot blot):也是廣義dot blot的一種。圓點的形狀因為點很小后期不利于光密度分析,并且孔不易清洗徹底。從點雜交角度來說,狹縫與斑點印跡沒有區(qū)別,只是終印跡形狀不同。如果覺得自己樣品量不大,擔心樣品不能填滿狹縫其實也不是問題,因為不填滿狹縫也不影響雜交結(jié)果,多是狹縫長短不整齊,另外,通過稀釋樣品填滿狹縫以后再做雜交,后印跡雜交結(jié)果不受影響。
紫外交聯(lián)儀英文:ultraviolet crosslinker簡稱:UV crosslinker