LUYOR-3415RG熒光蛋白激發(fā)光源用于棉花功能基因篩選和視覺標(biāo)記
近日,河南大學(xué)在《Front Plant Sci.》期刊發(fā)表文獻(xiàn)《Optimizing the Protein Fluorescence Reporting System for Somatic Embryogenesis Regeneration Screening and Visual Labeling of Functional Genes in Cotton》,文獻(xiàn)中指出利用LUYOR-3415熒光蛋白激發(fā)光源能夠棉花基因的篩選。下面是文獻(xiàn)摘要,文獻(xiàn)全文鏈接在網(wǎng)頁(yè)尾部。
蛋白質(zhì)熒光報(bào)告系統(tǒng)對(duì)于深入的生命科學(xué)研究至關(guān)重要,為體內(nèi)微觀生物活性的可視化提供了系統(tǒng)的標(biāo)記工具,并徹底改變了基礎(chǔ)研究。棉花體細(xì)胞再生效率低,造成棉花轉(zhuǎn)化困難。有利于利用熒光報(bào)告系統(tǒng)篩選轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞胚胎。然而,目前棉花中可用的熒光標(biāo)記系統(tǒng)有限。為了優(yōu)化棉花的熒光報(bào)告系統(tǒng),擴(kuò)大可用熒光蛋白的范圍,我們選擇了11種熒光蛋白,涵蓋紅色、綠色、黃色和青色熒光顏色,并用棉花表達(dá)。除mRuby2和G3GFP外,其他9種熒光蛋白(mCherry,tdTomato,sfGFP,Clover,EYFP,YPet,mVenus,mCerulean和ECFP)在轉(zhuǎn)基因愈傷組織和胚胎中穩(wěn)定而強(qiáng)烈地表達(dá),并在來(lái)自不同的棉花器官中遺傳自篩選的胚胎。此外,表達(dá)tdTomato的轉(zhuǎn)基因棉花在白光下呈粉紅色,不僅對(duì)愈傷組織、胚胎組織,而且對(duì)成熟植物的各種器官也呈粉紅色,為棉花遺傳轉(zhuǎn)化過程提供了視覺標(biāo)記,加速了轉(zhuǎn)基因事件的評(píng)價(jià)。此外,我們?cè)隗w內(nèi)構(gòu)建了表達(dá)mCherry標(biāo)記的轉(zhuǎn)基因棉花細(xì)胞器標(biāo)記物,覆蓋了七個(gè)特定的亞細(xì)胞區(qū)室:質(zhì)膜,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),土著體,線粒體,質(zhì)體,高爾基體和過氧化物酶體。我們還提供了一種簡(jiǎn)單而高效的策略,使用細(xì)胞器標(biāo)記物快速確定棉細(xì)胞中未表征蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞定位。zui后,我們建立了個(gè)使用氣孔特異性表達(dá)啟動(dòng)子(ProKST1,ProGbSLSP和ProGC1)的棉花氣孔熒光報(bào)告系統(tǒng)來(lái)驅(qū)動(dòng)三葉草表達(dá)。本研究中用于轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞胚胎篩選和功能基因標(biāo)記的優(yōu)化熒光標(biāo)記系統(tǒng)為加速體細(xì)胞再生效率和體內(nèi)監(jiān)測(cè)棉花中各種細(xì)胞過程提供了潛力。
LUYOR-3415RG激發(fā)光源用于熒光觀察
用變焦立體顯微鏡觀察轉(zhuǎn)基因棉花或煙草表皮細(xì)胞的胚胎愈傷組織,雄蕊,雌蕊,葉和種子組織中的熒光(奧林巴斯,東京,日本)。用共聚焦電子顯微鏡觀察轉(zhuǎn)基因棉花原生質(zhì)體,氣孔細(xì)胞,纖維,葉表皮細(xì)胞和根部樣品中的熒光(尼康,東京,日本)。大于 2 厘米的轉(zhuǎn)基因樣品2使用LUYOR-3415RG手持熒光燈(中國(guó)上海LUYOR)進(jìn)行觀察,并使用EOS 800D相機(jī)(佳能,中國(guó)北京)拍攝圖像,并帶有LUV-495A和LUV-590A熒光拍照濾鏡(LUYOR),用于綠色和紅色熒光觀察。使用濾光片。
上海峰志儀器有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)美國(guó)路陽(yáng)LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)光源,能夠觀察GFP、eGFP、dsred、Mcherry、Tdtomato等綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白的表達(dá),針對(duì)科研院所試用滿意付款。
詳細(xì)介紹:便攜式熒光蛋白激發(fā)光源LUYOR-3415RG
Published online 2022 Jan 7
文獻(xiàn)地址:https://doi.org/10.3389/fpls.2021.825212
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