GFP手電筒用于哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)基因研究的熒光標(biāo)記
為了確定熒光蛋白在眼睛中的可見性,我們使用了手持便攜式雙熒光手電筒下檢查了轉(zhuǎn)基因小鼠。32 行中有 27 行(84%)在便攜式GFP手電筒下激發(fā)后顯示出可見熒光(圖 2A)。這些眼睛標(biāo)記在便攜式長(zhǎng)波紫外線燈LUYOR-3280UV下也可見,如前所述,使用無處不在的熒光標(biāo)記。不同線條之間的熒光強(qiáng)度不同,只有在暗室中激發(fā)后才能看到zui暗的線條,即使沒有激發(fā),在室內(nèi)光線下也能看到zui亮的線條(圖 2B)。我們還在黑色和刺鼠背景上劃了一些線,以分析色素如何影響熒光眼標(biāo)記的可視化。色素的存在降低了熒光強(qiáng)度(圖 2B)。盡管如此,即使房間燈打開,在刺鼠和黑色背景中仍然很容易看到高和中 EGFP 和 tdTomato 線。然而,低表達(dá)的報(bào)告線在有色小鼠中是微弱的,盡管它們?cè)诤诎档姆块g中仍然可以檢測(cè)到。因此,這些記者可用于色素和非色素小鼠。重要的是,我們已經(jīng)將這些品系維持了許多代(某些品系中 > 25 代),并且我們沒有觀察到熒光標(biāo)記隨著時(shí)間的推移而失活。因此,可以從一代到下一代始終如一地跟蹤眼睛標(biāo)記熒光。
GFP手電筒和RFP手電筒照射效果對(duì)比:
鏡頭中表達(dá)的各種熒光蛋白可以在手持轉(zhuǎn)基因熒光手電筒照射下可直接觀察。使用GFP手電筒可以看到五個(gè)熒光眼標(biāo)記,而使用RFP手電筒只能看到 mOrange、tdTomato 和 mPlum。(B) EGFP 和 tdTomato 標(biāo)記表達(dá)在轉(zhuǎn)基因系 (低、中、高) 之間變化。插圖顯示 EGFP “高”線在無激發(fā)的室內(nèi)光下可見。EGFP“中”和 tdTomato“高”轉(zhuǎn)基因系也顯示在有色(Agouti,黑色)背景中。請(qǐng)注意,熒光眼標(biāo)記的可見性在有色背景中會(huì)降低。
GFP手電筒:
GFP手電筒又叫熒光蛋白觀察手電筒,英文名:GFP flashlight,GFP torch,GFP手電筒是通過發(fā)出藍(lán)光或紫外光激發(fā)動(dòng)植物體內(nèi)發(fā)熒光蛋白發(fā)光,通過專用的熒光蛋白觀察眼鏡,操作者就能夠直接觀察到綠色熒光蛋白的表達(dá)效果,是近幾年才上市的一款便攜式激發(fā)光源,是做轉(zhuǎn)基因研究不需要熒光顯微鏡就能觀察熒光的方便快捷的工具。
上圖:LUYOR-3280 GFP手電筒
上海峰志儀器有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)美國(guó)路陽、美國(guó)nightsea GFP手電筒,RFP手電筒,能夠觀察GFP、eGFP、mOrange、tdTomato 和 mPlum等多種熒光蛋白在動(dòng)植物上的表達(dá)。們免費(fèi)試用,滿意付款,我們?cè)诒本?、鄭州、哈爾濱、武漢、??谠O(shè)有代理商,詳細(xì)聯(lián)系方式請(qǐng)按照網(wǎng)頁底部的聯(lián)系方法聯(lián)系。